为了抓住杨靖宇，敌人还对杨靖宇所部采取了“梳篦式讨伐”和“狗蝇子战术”。先是满山遍野地搜查，杨靖宇率队甩掉一股则又遇上一股，很难摆脱。敌人发现杨靖宇部队踪迹后则死死盯住，穷追不舍。杨靖宇指挥部队在漾江西部、辉南东部山区连日与敌作战，不得休整，有时甚至一日数战。
1月28日，杨靖宇率队转移到辉南县四方顶子西坡马屁股山，但敌人“讨伐队”又紧紧追了上来。29日晨，杨靖宇率队与范、桑、申、曲等伪警察大队激战，突围出去，但部队损失较大，伤亡约70人。这时杨靖宇身边只剩下特卫排、机枪连一排和少年铁血队60余人了。
2月1日，特卫排排长张秀峰携带现金9960元、手枪4支及机密文件多件，向五斤顶子伪森林警察队投降，进一步暴露了杨靖宇及第1路军总司令部的行踪。2月2日杨靖宇率队在江县那尔轰北方、西方和大西北岔北方先后与程、范、申等伪警察大队3次交战，部队再次受到严重损失。到2月4日，杨靖宇所部尚有16人，2月10日减少到12人，2月12日，只有7人。此后，杨靖宇又让警卫员黄生发、司务长刘福泰等4名伤员转移，最后他身边只有朱文范、聂东华两名战士。
2月15日晨，敌人在江县五斤顶子西北方发现了杨靖宇的足迹，立即纠集崔、程、唐等伪警察大队及五斤顶子伪森林警察队共600余人跟踪追击。这时，朱文范、聂东华正在外边寻找粮食，杨靖宇只身一人与敌人且战且退。到下午3时许，敌人追得越来越近了，杨靖宇便利用距敌300米的一个有利地势，向敌人猛烈射击，打得敌人趴在地上不敢起身。
这时，敌“讨伐队”副队长伊藤（日本人）向杨靖宇高喊：你跑不了啦，快投降吧！
杨靖宇将计就计，答道：“别开枪，你过来一下，我有话说。”在伊藤刚站起来的一瞬间，杨靖宇举枪击中他的胸部。伊藤被打倒后，敌大队长也气急败坏地站起来向杨靖宇追来，结果被打伤了大腿。
这次战斗，杨靖宇毙敌1人，伤敌6人，他的左手也被敌人击伤。这时，杨靖宇乘敌人混乱之机，迅速进入森林，甩掉了敌人。敌人穷追不舍，继续追寻，这天夜里，整整追了一夜。敌人被拖得疲惫不堪，不断有人掉队，最后600人的“讨伐队”，只剩下50人。到2月16日凌晨3时半，敌人在江县大北山东方3公里处失掉了追踪的线索。
这时，杨靖宇已转移到朝（朝阳镇）抚（抚松）公路南侧七个顶子附近，按事先约定的地点去等候买食物的朱、聂两名警卫员。
2月18日，朱文范和聂东华在江县大东沟购买食物时，被敌人发现。敌大东沟警防队和特搜班立即出击，朱文范、聂东华与敌人激战半个小时后牺牲。敌人从他们身上搜出手枪、现金、表、钢笔、口琴和杨靖宇的印鉴，断定杨靖宇就在附近。于是，敌人进一步缩小了包围圈，切断粮源，封锁交通，并向附近村民发出通告：“进山砍柴绝对不许携带午饭。”
在规定时间内，杨靖宇未见朱文范、聂东华回来，估计他们遇到了危险，于是只身向三道江附近走去。这时杨靖宇已数日未进食，并身患重感冒，衣服和棉鞋也已破烂不堪，辗转于江县山林中。
2月23日，杨靖宇来到江县保安村西南的三道崴子，遇见了伪排长赵廷喜等4个打柴人。杨靖宇见他们都是农民，便委托他们代为购买粮食和棉鞋，并表示可以多给一些钱。这几个人对他说：“你还是投降吧，如今满洲国不会对投降者杀头的。”
杨靖宇坚定地回答说：“我是中国人，绝不能向日寇投降的，良心不允许我这样做，这样做也对不起广大人民。”
最后，这几个人答应了杨靖宇的要求。但是赵廷喜在返回的路上遇到了日本特务李正新，他们便把这一情况报告了伪村公所。伪警察队本部接到这一情报后，断定此人就是杨靖宇，便马上派“讨伐队”出击。并从附近调来更多兵力急赴三道崴子。但是，当赵廷喜带领敌人来到约定地点时，却不见人影。
原来杨靖宇为防止意外，已经离开约定地点。接着，敌人顺着雪地上的脚印搜寻，在三道崴子103高地附近发现了杨靖宇，战斗随之展开。这时的杨靖宇，饥寒交迫，病魔缠身，身体极度虚弱，但他仍顽强抵抗，打一枪转一处，巧妙地与敌人周旋。
最后，敌人在490高地附近的三道漾江江边将杨靖宇重重包围，并不断迫近。在距杨靖宇50米时，敌人再次高喊：“怎么抵抗也没用了，快投降吧！”
杨靖宇大义凛然，视死如归，仍然向敌人猛射。敌人见生擒无望，于是下达了“打死他”的命令。又交战20分钟左右，到下午4时半，杨靖宇被敌弹击中胸膛，壮烈殉国。杨靖宇牺牲后，敌人残忍地割下他的头颅，剖开他的遗体，发现他的胃里一粒粮食都没有，只有草根、树皮和棉絮。敌人震惊了，不得不承认杨靖宇不愧是个英雄。
杨靖宇，原名马尚德。1905年2月13日生于河南省确山县古城乡李湾村。读书期间受到革命思想影响，积极参加当地学生的“五四”“五卅”等爱国运动。1926年秋加入中国共青团。当年冬受党派遣到确山县从事农运。1927年2月任确山县农民协会执委会委员长兼县农协自卫军总指挥。4月，带领两万农军攻下县城，建立了人民政权——确山县临时治安委员会，被选为常务委员会代主席，主持县政，一直坚持到7月。5月，加入中国共产党。11月带领农军在刘店暴动成功，任农军总指挥，并率农军转战豫南，开辟了以刘店为中心的方圆百余里的游击区。
杨靖宇先后5次被捕，直至“九一八”事变后，经组织营救才得出狱。出狱后先后任中共哈尔滨市道外区委书记、哈尔滨市委书记等职，同时还任东北反日总会党团书记。1932年4月兼任中共满洲省委军委书记。1933年6月调到南满工作。当年9月18日成立东北人民革命军第1军独立师，杨靖宇任师长兼政治委员。第1军独立师发展很快，于1934年11月正式扩编成军，杨靖宇任东北人民革命军第1军军长兼政治委员，积极联合其他抗日武装，开创联合作战的新局面。1936年7月，东北人民革命军第1军改编成东北抗日联军第1军，杨靖宇任军长兼政治委员。随后第1军与第2军合编成东北抗联第1路军，杨靖宇任第1路军总司令兼政治委员，同时任中共南满省委委员。
从任独立师师长兼政治委员到第1路军总司令兼政治委员期间，他带领抗联指战员战斗在东北抗日游击战争的最前线，曾率部全歼伪军邵本良部，威震南满；为打通与关内红军的联系，两次组织西征；指挥袭击通缉铁路隧道工程现场以及蚊子沟之战、埋财沟之战、岔沟突围战、木箕河林场之战、大蒲柴河之战等，沉重地打击与威胁了日伪统治。“七七”事变后，又率领抗联第1路军英勇征战，主动出击，牵制日军入关，有力地支援了全国抗战。1938年冬之后，又根据形势的恶化及时改编部队，调整战略战术，带领抗联将士克服重重困难，在长白山区艰苦奋战，直至1940年2月23日在漾江县牺牲。